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上海通蔚生物講解ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定標(biāo)本的分解
更新時(shí)間:2025-07-08   點(diǎn)擊次數(shù):49次

隨著科研產(chǎn)品ELISA試劑盒供應(yīng)商的增多,困擾客戶的問(wèn)題也隨之出現(xiàn),比如原裝ELISA試劑盒與分裝ELISA試劑盒的區(qū)別,產(chǎn)品的代測(cè)情況,本公司擁有一對(duì)一全程指導(dǎo)服務(wù),為客戶排憂解難,

正確實(shí)驗(yàn)我們才可以得到有效的數(shù)據(jù),要是操作錯(cuò)誤不僅會(huì)得到的數(shù)據(jù)不準(zhǔn),還浪費(fèi)我們時(shí)間。下面給大家講解一下ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定標(biāo)本的分解。

一、標(biāo)本保存不當(dāng)

血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性;標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(如一天以上),有時(shí)抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測(cè)定的宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定,5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。

ELISA試劑盒


二、標(biāo)本凝集不全

在沒(méi)有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開(kāi)始凝固,18~24h凝固。有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;這類情況于次日復(fù)查時(shí)因血凝已,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復(fù)查結(jié)果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,解決的辦法是血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/p>

三、標(biāo)本溶血

由于各種人為原因引起的,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為標(biāo)記的,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,干擾測(cè)定結(jié)果。為克服上述干擾作用,標(biāo)本采集時(shí)必須注意避免溶血。

四、標(biāo)本受細(xì)菌污染

因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。

五、標(biāo)本管中添加物質(zhì)的影響

抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠有一定干擾作用。


通過(guò)以上的分析和總結(jié),排除ELISA試劑盒因素和操作因素,再有就是從標(biāo)本因素進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾,從而確保檢測(cè)的結(jié)果.

上海通蔚生物科技有限公司

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